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[科普中國(guó)]-淚液乳酸脫氫酶

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淚液中的LDH(EC1.1.1.27)和MDH(EC1.1.1.37)主要來自眼角膜上皮。它們?cè)跍I液中的濃度約為血清中該酶濃度的20倍。淚LDH主要含M亞基,以LDH5和LDH4含量最高。淚液MDH同工酶,用醋纖膜電泳,可分離出MDHs和MDHm,健康人淚液以MDHs為主。正常值

LDH: 1.29-9.02U/L LDH同工酶:LDH1 0.66±0.51% MDH活性: 0.25-2.2U/L MDH同工酶:MDHs 80%-98.1% 以MDHm>20%為異常 LDH/MDH:70歲者4.55±0.51

臨床意義異常結(jié)果:在細(xì)菌性角膜潰瘍和角結(jié)膜化學(xué)傷時(shí),淚LDH和MDH活性下降。凡角結(jié)膜上皮損傷,LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高,但MDHm更能反映角膜組織損害的情況和病變程度。如在角膜潰瘍和可疑干性角結(jié)膜炎(KCS),MDHm升高而淚LDH的H/M比值卻無顯著變化。 淚LDH同工酶和LDH/MDH比值的測(cè)定有助于沙眼和慢性結(jié)膜炎的鑒別診斷。兩者淚液LDH的H/M比值均明顯下降,但沙眼時(shí),淚液LDH/MDH比值無變化,而且LDH的M亞基升高更顯著。 需要檢查人群:角膜疾病的診斷。

注意事項(xiàng)不合宜人群:一般無特殊人群。 檢查前禁忌:用手揉眼睛,這樣會(huì)使眼睛感染,加重病情,影響檢查效果。 檢查時(shí)要求:配合醫(yī)生指示做好相關(guān)檢查。

檢查過程(1)比色法: ① 乳酸鉀、乳酸鈉也可作為L(zhǎng)DH底物,但因其為水溶液,含量不夠準(zhǔn)確,且保存不當(dāng)易產(chǎn)生酮酸類物質(zhì),抑制酶促反應(yīng)。而乳酸鋰為固體,穩(wěn)定,易于稱量。 ② 除二乙醇胺緩沖液外,也可用Tris或焦磷酸緩沖液,避免了原金氏法中甘氨酸緩沖液對(duì)LDH的抑制作用,提高了陽性檢出率。 ③ 比色應(yīng)在5-15min內(nèi)完成,否則吸光度降低。 ④ 結(jié)果>2500U時(shí),可用生理鹽水稀釋標(biāo)本后再測(cè),其結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。 (2)連續(xù)監(jiān)測(cè)法: ① 標(biāo)本勿溶血,當(dāng)溶血達(dá)Hb 0.8g/L時(shí),LDH活性可升高58%。 ② 標(biāo)本于室溫(25℃)保存,2天內(nèi)酶活性穩(wěn)定,冰箱保存酶活性降低,-20℃過夜LDH3、LDH4則全部失活。 ③ 用血清或肝素抗凝血漿測(cè)定結(jié)果滿意,草酸鹽可抑制LDH活性。 ④ 復(fù)溶后溶液變濁或初始吸光度>0.5應(yīng)棄去。 ⑤ 利用正逆雙向反應(yīng)均可測(cè)定乳酸脫氫酶活性,但因反應(yīng)溫度、底物和緩沖液濃度不同,其參考區(qū)間也有差異。以乳酸和NAD為底物,在340nm監(jiān)測(cè)吸光度增高速率為正向反應(yīng),以LD-L表示;以丙酮酸和NADH為底物,監(jiān)測(cè)340nm吸光度下降速率為逆向反應(yīng),以LD-P表示。正逆反應(yīng)兩法相比,LD-L法的主要優(yōu)點(diǎn)是:A.正向反應(yīng)底物液的穩(wěn)定性比逆向反應(yīng)的穩(wěn)定性大,前者冰箱可保存6個(gè)月以上,而后者僅幾天;B.速率反應(yīng)的線性范圍(吸光度對(duì)監(jiān)測(cè)時(shí)間t作圖)較寬;C.重復(fù)性比LD-P好。由于逆向反應(yīng)速度比正向反應(yīng)速度快,其參考值約為L(zhǎng)D-L的2倍。

相關(guān)疾病流行性出血性結(jié)膜炎,視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤

相關(guān)癥狀眼球斑點(diǎn),眼干澀酸脹,易疲勞,眼睛刺痛

1本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:

楊凡 - 副主任技師 - 上海同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院 檢驗(yàn)科