[科普中國(guó)]-ABO血型鑒定

ABO血型鑒定是即指ABH血型抗原的檢測(cè)。紅細(xì)胞含A抗原的叫A型，含B抗原的叫B型，含A和B抗原的叫AB型；不含A、B抗原，而含H抗原的稱(chēng)O型。

正常范圍ABO血型分為A型、B型、O型、AB型。

檢查介紹ABO血型鑒定即指ABO血型抗原的檢測(cè)。

臨床意義ABO血型鑒定主要用于：

1、臨床輸血：當(dāng)循環(huán)血量不足或大失血或貧血需進(jìn)行輸血治療，在輸血前必須先選擇血型相同的供血者，再進(jìn)行交叉配血，完全相同后才能輸血。

2、在皮膚、腎移植等器官移植的時(shí)候選擇ABO血型相符的供體。

3、不孕癥和新生兒溶血癥病因的分析。

4、親子鑒定等。

鑒定方法生理鹽水凝集法

①玻片法：操作簡(jiǎn)單，適于大量標(biāo)本檢查，但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)；被檢查者如血清抗體效價(jià)低，則不易引起紅細(xì)胞凝集，因此，不適于反向定型。

②試管法：由于離心作用可加速凝集反應(yīng)，故反應(yīng)時(shí)間短，而且，借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密，促進(jìn)凝集作用，適于急診檢查。

紅細(xì)胞亞型抗原性弱，如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí)，易造成漏檢或誤定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此類(lèi)錯(cuò)誤。

玻片法凝集結(jié)果判斷：紅細(xì)胞呈均勻分布，無(wú)凝集顆粒，鏡下紅細(xì)胞分散。

在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn)：

①呈一片或幾片凝塊，僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（++++）。

②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊，有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（+++）。

③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒，游離紅細(xì)胞約占1/2為（++）。

④肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察，每凝集團(tuán)中有5～8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為（+）。

⑤可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周?chē)泻芏嗟挠坞x紅細(xì)胞（±）。

⑥可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。

⑦鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布為（-）。

凝膠微柱法

是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體，加入試劑、標(biāo)本，用專(zhuān)用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化，定量加樣，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)

準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：①特異性：只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集，無(wú)非特異性凝集。②效價(jià)：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價(jià)均在1：128以上。③親和力：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是15s、30s和45s；抗B對(duì)B型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s。凝集強(qiáng)度為3min時(shí)，凝塊不小于1mm2。④冷凝集素效價(jià)：在1：4以下。⑤無(wú)菌。⑥滅活補(bǔ)體。 1

注意事項(xiàng)1、所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。

2、加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。

3、雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37℃條件，可使反應(yīng)減弱。

4、幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。

5、玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。

6、正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。

7、反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價(jià)又低，因而出生6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。 2

ABO血型系統(tǒng)英文：ABO blood group system 根據(jù)紅細(xì)胞表面有無(wú)特異性抗原（凝集原）A和B來(lái)劃分的血液類(lèi)型系統(tǒng)。ABO血型系統(tǒng)是1900年奧地利蘭茨泰納發(fā)現(xiàn)和確定的人類(lèi)第一個(gè)血型系統(tǒng)。根據(jù)凝集原A、B的分布把血液分為A、B、AB、0四型。紅細(xì)胞上只有凝集原A的為A型血，其血清中有抗B凝集素；紅細(xì)胞上只有凝集原B的為B型血，其血清中有抗A的凝集素；紅細(xì)胞上A、B兩種凝集原都有的為AB型血，其血清中無(wú)抗A、抗B凝集素；紅細(xì)胞上A、B兩種凝集原皆無(wú)者為O型，其血清中抗A、抗B凝集素皆有。具有凝集原A的紅細(xì)胞可被抗A凝集素凝集；抗B凝集素可使含凝集原B的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。輸血時(shí)若血型不合會(huì)使輸入的紅細(xì)胞發(fā)生凝集，引起血管阻塞和血管內(nèi)大量溶血，造成嚴(yán)重后果。所以在輸血前必須作血型鑒定。正常情況下只有ABO血型相同者可以相互輸血。在缺乏同型血源的緊急情況下，因O型紅細(xì)胞無(wú)凝集原，不會(huì)被凝集，可輸給任何其他血型的人。AB型的人，血清中無(wú)凝集素，可接受任何型的紅細(xì)胞。但是異型輸血輸入量大時(shí)，輸入血中的凝集素未能被高度稀釋?zhuān)锌赡苁故苎叩募t細(xì)胞凝集。所以大量輸血時(shí)仍應(yīng)采用同型血。臨床上在輸血前除鑒定ABO血型外，還根據(jù)凝集反應(yīng)原理，將供血者和受血者的血液作交叉配血實(shí)驗(yàn)，在體外確證兩者血液相混不發(fā)生凝集，方可進(jìn)行輸血以確保安全。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)存在于紅細(xì)胞上的凝集原（即血型抗原）也存在于其他血細(xì)胞和一般組織細(xì)胞。所有細(xì)胞表面血型抗原的特異性可作為機(jī)體免疫系統(tǒng)鑒別自身和異物的標(biāo)志。因此，在臨床實(shí)踐中血型鑒定也是組織器官移植成敗的關(guān)鍵。人類(lèi)血型有遺傳特性，決定血型的血型抗原即凝集原ABOA和B及其前身物H，分別受ABO三個(gè)等位基因控制。A、B基因?yàn)轱@性基因，O（H）基因?yàn)殡[性基因。它們的遺傳規(guī)律所顯示的父、母血型與子代血型間的關(guān)系，在法醫(yī)學(xué)上可作為否定親子關(guān)系的依據(jù)，若再配合其他血型系統(tǒng)的測(cè)定，則可判斷親子關(guān)系。

血型不僅在輸血上有重要意義，而且在人種學(xué)、遺傳學(xué)、法醫(yī)學(xué)、移植免疫、疾病抵抗力（或易感性）等方面都有應(yīng)用價(jià)值，在輸血前，一定要檢查病人(受血者)和輸血人（供血者）的血型，并且要進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。在臨床醫(yī)學(xué)中，除輸血、移植免疫外，對(duì)新生兒溶血病、自身免疫性溶血性貧血特異性抗體的檢查，也都需要血型知識(shí)和有關(guān)技術(shù)。ABO血型抗原具有種族差異。例如，中歐地區(qū)的人群中，約40%以上的人為A型，近40%的人為O型，10%的人為B型，6%的人為AB型；而90%的美洲土著人為O型。

舉例分析通常只用兩種抗血清即抗A及抗B血清，就可將群體分為四種血型。

根據(jù)血型的遺傳規(guī)律，和臨床工作方例起見(jiàn)，配偶間所生子女的血型如下：

各種ABO配偶所生子女的血型:

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鑒定原理常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗體，依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有：①正向定型：用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定：凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性，呈散在游離狀態(tài)為陰性。ABO血型定型原則見(jiàn)表1-5-2。3

鑒定方法（1）生理鹽水凝集法：①玻片法：操作簡(jiǎn)單，適于大量標(biāo)本檢查，但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)；被檢查者如血清抗體效價(jià)低，則不易引起紅細(xì)胞凝集，因此，不適于反向定型。②試管法：由于離心作用可加速凝集反應(yīng)，故反應(yīng)時(shí)間短，而且，借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密，促進(jìn)凝集作用，適于急診檢查。

紅細(xì)胞亞型抗原性弱，如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí)，易造成漏檢或誤定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此類(lèi)錯(cuò)誤。

玻片法凝集結(jié)果判斷：紅細(xì)胞呈均勻分布，無(wú)凝集顆粒，鏡下紅細(xì)胞分散。在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn)：①呈一片或幾片凝塊，僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（++++）。②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊，有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（+++）。③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒，游離紅細(xì)胞約占1/2為（++）。④肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察，每凝集團(tuán)中有5～8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為（+）。⑤可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周?chē)泻芏嗟挠坞x紅細(xì)胞（±）。⑥可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。⑦鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布為（-）。

（2）凝膠微柱法：是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體，加入試劑、標(biāo)本，用專(zhuān)用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化，定量加樣，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)

準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：①特異性：只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集，無(wú)非特異性凝集。②效價(jià)：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價(jià)均在1：128以上。③親和力：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是15s、30s和45s；抗B對(duì)B型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s。凝集強(qiáng)度為3min時(shí)，凝塊不小于1mm2。④冷凝集素效價(jià)：在1：4以下。⑤無(wú)菌。⑥滅活補(bǔ)體。

注意事項(xiàng)一般注意事項(xiàng)：①所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。②加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37℃條件，可使反應(yīng)減弱。④幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。⑤玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min，否則凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。⑥正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價(jià)又低，因而出生6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。 4

本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:

慎慧 - 研究員 - 同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院 檢驗(yàn)科