[科普中國]-肉與肉制品羥脯氨酸含量測定

肉與肉制品羥脯氨酸含量測定，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)號為GB/T 9695.23-2008，該標(biāo)準(zhǔn)代替了原 GB/T 9695.4-1990（現(xiàn)已廢止）。GB/T 9695.23-1990由中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會于2008年8月28日發(fā)布，適用于肉與肉制品中羥脯氨酸含量的測定方法，2009年3月1日起開始實(shí)施。1

原理用硫酸于105℃水解試樣，過濾、稀釋水解產(chǎn)物。羥脯氨酸經(jīng)氯胺T氧化后，與對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)生成紅色化合物，在波長558nm處進(jìn)行比色測定。1

試劑約3mol/L的硫酸溶液，PH=6.8的緩沖液（用500mL的水溶解26.0g的一水檸檬酸、14.0g的氫氧化鈉和78.0g的無水乙酸鈉并轉(zhuǎn)入1L容量瓶中，加250ml的正丙醇，用水定容），氯胺T溶液，顯色劑，羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

儀器和設(shè)備電動絞肉機(jī)，圓底或平底燒瓶，干燥箱，圓形濾紙，PH計(jì)，鋁箔或不透明塑料薄膜，水浴鍋，分光光度計(jì)，比色皿，分析天平，容量瓶，表面皿。

取樣實(shí)驗(yàn)室收到的樣應(yīng)具有代表性，且在運(yùn)輸和儲藏過程中沒損失或發(fā)生變化。

取樣方法參見GB/T 9695.192。

取有代表性的樣200g。

分析步驟取樣稱取試樣4g于燒瓶中，避免粘在燒瓶壁上。

水解量取30mL硫酸溶液加入燒瓶中，用表面皿蓋住，于105℃干燥箱內(nèi)恒溫16h。

用圓形濾紙趁熱將水解產(chǎn)物過濾至250mL容量瓶中，用10ml硫酸溶液分3次洗滌燒瓶和濾紙，合并至上述容量瓶中。用水定容，搖勻。

測定

空白測定用水代替稀釋溶液，重復(fù)“測定”中的操作。

標(biāo)準(zhǔn)曲線用4.00mL羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)工作液依次代替稀釋后的水解產(chǎn)物，重復(fù)“測定”中的操作。

以扣除了空白的標(biāo)準(zhǔn)工作液的吸光度為縱坐標(biāo)，以相應(yīng)的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再次分析應(yīng)重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。