[科普中國]-肉與肉制品總磷含量測定

肉與肉制品總磷含量測定，現(xiàn)行標準號為GB/T 9695.4-2009，該標準代替了原GB/T 9695.4-1988（現(xiàn)已廢止）。GB/T 9695.4-2009由中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局中國國家標準化管理委員會于2009年4月8日發(fā)布，適用于肉與肉制品中總磷含量的測定方法，分光光度法的檢出限為0.1mg/kg，自2009年5月1日起開始實施。1

沉淀稱量法原理試樣經(jīng)干法灰化或濕法消化，制成稀酸溶液，在5%~10%的硝酸酸度下，磷酸根與鉬酸鈉和喹啉反應(yīng)生成磷鉬酸喹啉沉淀。經(jīng)過洗滌后，在180℃ ±20℃ 下烘干稱量，求出磷的含量。

反應(yīng)式為：

H3PO4+12Na2MoO4+24HNO3+3C9H7N=(C9H7N)3H3PO4·12MoO3· H2O↓+24NaNO3+11H2O

試劑若無特別說明,所用試劑均為分析純,所用水應(yīng)符合GB/T 6682的要求。2

鹽酸；硝酸；高氯酸；鹽酸溶液:鹽酸+水=1+1；硝酸溶液:硝酸+水=1+1；丙酮；鉬酸鈉；檸檬酸；喹啉；喹鉬檸酮沉淀劑；混酸消化液：硝酸+高氯酸=7+1。

儀器和設(shè)備分析天平：可準確稱重至0.001g；坩堝:瓷坩堝或石英坩堝；機械設(shè)備：用于試樣的均質(zhì)，包括絞肉機、斬拌機等肉類組織粉碎機；馬弗爐：可控溫550℃± 20℃；干燥箱：可控溫180℃ ±20℃ ；電熱板；G4坩堝。

分析步驟1. 試樣液制備

1）試樣準備

按GB/T 9695.19規(guī)定的方法取樣3。至少取有代表性的試樣200g，使用適當?shù)臋C械設(shè)備將試樣均質(zhì)。均質(zhì)后的試樣盡快分析，否則應(yīng)密封低溫貯存，防止試樣變質(zhì)或成分發(fā)生變化。貯存的試樣在啟用時，應(yīng)重新混勻。

2）試樣消化

A.干灰化法

稱取1g~2g試樣(精確至0.001g)放人坩堝中，置于130℃ ±10℃ 的干燥箱中烘1h，使試樣脫水。將坩堝在可調(diào)電爐上緩慢加熱，使試樣炭化，開始時用小火加熱，以防止試樣濺出，待大煙冒過后提高溫度，使試樣完全炭化，直至不冒煙為止。炭化好的試樣放入馬弗爐中，于550℃ ±20℃下灰化2h?；一玫脑嚇討?yīng)是灰白色，若灰分中有黑色碳粒，應(yīng)取出坩堝，冷卻至室溫后，加硝酸溶液濕潤，然后在電熱板上烘干后，再置于550℃ ±20℃馬弗爐中灰化，直至灰分成灰白色。

灰化好的試樣用1.25mL鹽酸溶液溶解，轉(zhuǎn)移到25mI'容量瓶中，用少量水沖洗坩堝多次，合并洗液，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液為試樣液，備用。

B. 濕消化法

稱取1g~2g試樣(精確至0.001g)，放入100mL錐形瓶中，加人混酸消化液20mL，放入2粒玻璃珠，蓋上小漏斗，靜置過夜。樣品在可調(diào)電爐上低溫緩慢加熱，以防產(chǎn)生大量泡沫和噴濺，消化至溶液顏色變淺，并有大量白煙時，將電爐關(guān)閉，用余溫繼續(xù)加熱。當溶液出現(xiàn)淡黃、微綠接近無色時，立即停止加熱，并將其從電爐上取下。若消化過程中溶液顏色變黑，應(yīng)立即停止加熱，冷卻后補加適量混酸消化液，按原步驟操作直至消化完全。用10mL蒸餾水沖洗小漏斗及錐形瓶內(nèi)壁，將錐形瓶置于150℃電熱板上蒸發(fā)至錐形瓶中液體接近2 mI~3 mL，取下冷卻至室溫。將樣品轉(zhuǎn)移至25mI容量瓶中，用少量水多次洗滌錐形瓶，洗液合并倒入容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液為試樣液。

2. 空白液制備

除不稱取試樣外，均按試樣消化步驟進行操作。

3.測定

精確吸取15.00mL試樣液、空白液分別置于250mL燒杯中，加10mL硝酸溶液，用水稀釋至100mI，蓋上表面皿，于電爐上加熱至沸。取下燒杯，在不斷攪拌下，加人50mL喹鉬檸酮沉淀劑，繼續(xù)加熱至微沸，并保持微沸2min，取下燒杯，輕輕攪拌片刻使沉淀迅速沉降。靜置冷卻后，用預(yù)先烘干至恒重的G4坩堝抽濾。先將上層清液濾完，然后以傾瀉法洗滌1次~2次，將沉淀全部轉(zhuǎn)移至G4坩堝中，再用水洗滌沉淀5次~6次。將坩堝底部的水用濾紙吸干后，于180℃ ±20℃ 干燥箱中干燥1h，取出，放人干燥器中冷卻0.5h后稱量。再將G4坩堝放入180℃ ±20℃干燥箱中干燥0.5h，取出，放人干燥器中冷卻0.5h后稱量。至前后兩次質(zhì)量差不超過2mg，即為恒量。

4. 平行試驗

按以上步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。

分光光度法原理樣品經(jīng)干法灰化或濕法消化后制成稀酸溶液，磷酸根與偏釩酸銨、鉬酸銨的混合試劑反應(yīng)生成黃色化合物，于430nm處測量吸光度，以標準曲線法計算磷含量。

試劑若無特別說明，所用試劑均為分析純，所用水應(yīng)符合GB/T 6682的要求。2

硝酸；硝酸:硝酸+水=1+2；偏釩酸銨(2.5g/L)；鉬酸銨(50g/L)；顯色劑；100ug/mL磷標準溶液。

儀器和設(shè)備實驗室常規(guī)設(shè)各及下列儀器。

注意:所有玻璃器皿需用不含磷的洗滌劑徹底洗凈，然后用水沖洗。

分析天平:可準確稱重至0.001g；坩堝:瓷坩堝或石英坩堝；機械設(shè)備:用于試樣的均質(zhì)。包括:絞肉機、斬拌機等肉類組織粉碎機；馬弗爐：可控溫550℃ ± 20℃；干燥箱；電熱板；分光光度計。

分析步驟1.樣液制備

1）試樣準備：同上。

2）試樣消化：同上。

2. 空白液制備

除不稱取試樣外,均按試樣消化步驟進行操作。

3. 標準工作曲線的繪制

精確吸取磷標準液0.00mL，0.10mL，0.20mL，0.30mL，0.40mL，0.50mI，到25mL容量瓶中。加人8mL顯色劑，用水稀釋至刻度，混勻。此時容量瓶中溶液磷的濃度分別為0.00ug/mL，0.40ug/mL，0.80ug/mL，1.20ug/mL，1,60ug/mL，2.00ug/mL，靜置15min后于在430nm處測定其吸光度，以標準工作液中磷的質(zhì)量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。

4. 測定

精確吸取2mL試樣液、空白液分別置于25mL的容量瓶中，以下按照步驟與標準工作液同時進行。根據(jù)試樣液的吸光度，從標準曲線上查出溶液中對應(yīng)的總磷的質(zhì)量。

5. 平行試驗

按以上步驟對同一試樣進行平行試驗測定。