[科普中國]-肉與肉制品鈣含量測定

原子吸收法原理

試樣經(jīng)灰化或消化后制成稀酸溶液，以鑭溶液消除陰離子效應，原子化后，在422.7nm測定其吸收值與鈣濃度成正比，與標準系列比較測定鈣含量。

試劑若無特別說明，所用試劑均為分析純，所用水應符合GB/T 6682的要求。

（1）硝酸：優(yōu)級純。

（2）高氯酸：優(yōu)級純。

（3）鹽酸：優(yōu)級純。

（4）硝酸溶液：硝酸+水=1+1。

（5）氯化鑭溶液（20g/L）：稱取23.45g氯化鑭于250mL燒杯中，用少量水潤濕后加入75mL鹽酸，將制成的溶液轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加水至刻度，混勻。

（6）混酸消化液：硝酸+高氯酸=7+1。

（7）鹽酸溶液：鹽酸+水=1+1。

（8）鈣標準溶液（100ug/mL）：國家有證標準物質(zhì)，或按下述方法配置：稱取在105-110℃，干燥2h的基準碳酸鈣0.2497g于燒杯中，加入少量鹽酸溶液使之溶解，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。

（9）鈣標準使用液（10ug/mL）：吸取鈣標準溶液5.00mL，用氧化鑭溶液定容至50mL。

（10）硝酸溶液：硝酸+水=1+9。

儀器和設備所有玻璃儀器均以硝酸溶液浸泡2h以上，用去離子水沖洗后晾干或烘干，方可使用。

實驗室常規(guī)設備及下列儀器。

（1）機械設備：用于式樣的均質(zhì)。包括絞肉機、斬拌機等肉類組織粉碎機。

（2）馬弗爐：可控溫于550℃±20℃。

（3）干燥箱。

（4）石英坩堝。

（5）分析天平：可準確稱重至0.001g。

（6）電熱板。

（7）原子吸收分光光度計。

分析步驟（1）試樣液制備

試樣準備

按GB∕T 9695.19規(guī)定的方法取樣。至少取有代表性的試樣200g，使用適量的機械設備，將試樣均質(zhì)，均質(zhì)后的試樣盡快分析，否則應密閉低溫貯存，防止試樣或成分發(fā)生變化，貯存的試樣在啟用時應重新混勻。

試樣消化

干灰化法

稱取1-2g試樣（精確至0.001g）放入石英坩堝中，置于130±10℃干燥箱中烘1h，使試樣脫水。將坩堝在在可調(diào)電爐上緩慢加熱，使試樣炭化，開始是用小火加熱，以防止試樣濺出，待大煙冒過后提高溫度，使試樣完全炭化，直至補冒煙為止。炭化好的試樣放入馬弗爐中，于550±20℃下灰化2h。灰化好的試樣應是灰白色，若灰分中有黑色碳粒，應取出坩堝，冷卻至室溫，加硝酸溶液濕潤，然后在電熱板上烘干后，在至于550±20℃馬弗爐中灰化，直至灰分呈灰白色。

灰化好的試樣用1.25mL硝酸溶液溶解，轉(zhuǎn)移到25mL容量瓶中，用氯化鑭溶液沖洗石英坩堝多次，合并洗液，并用氯化鑭溶液稀釋至刻度，搖勻。此溶液為試樣液。

濕消化法

稱取1-2g試樣（精確至0.001g）放入100mL錐形瓶中，加入混酸消化液20mL，放入兩粒玻璃珠，蓋上小漏斗，靜置過夜。樣品在可調(diào)電爐上低溫緩慢加熱，以防產(chǎn)生大量泡沫和噴濺，消化至溶液顏色變淺，并有大量白煙時，將電爐關閉，用余溫繼續(xù)加熱。當溶液出現(xiàn)淡黃、微綠接近無色時，從電爐上取下。若消化過程中溶液顏色變黑，應立即停止加熱，冷卻后補加適量混酸消化液，按原步驟操作直至消化完全。用10mL蒸餾水沖洗校漏斗及錐形瓶內(nèi)壁，將錐形瓶置于150℃電熱板上蒸發(fā)至錐形瓶中液體接近2-3mL，取下冷卻至室溫。將樣品轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用氯化鑭溶液多次洗滌錐形瓶，洗液合并到容量瓶中，并用氯化鑭溶液稀釋至刻度，搖勻，此溶液為試樣液。

（2）標準工作液制備

精密吸取鈣標準使用液0.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL，分別置于25mL容量瓶中，加1.25mL硝酸溶液，用氯化鑭溶液稀釋至刻度，混勻。此時容量瓶中溶液的鈣濃度分別為0.00ug/mL、0.80ug/mL、1.60ug/mL、2.40ug/mL、3.20ug/mL、4.00ug/mL。

（3）空白液制備

除不稱取試樣外，均按試樣消化步驟進行操作。

（4）測定

根據(jù)儀器型號，將儀器調(diào)至最佳條件，將標準工作液、試樣液和空白液分別導入空氣-乙炔火焰原子吸收分光光度計中，測其吸光度。測定參考條件：燈電流7.5mA，波長422.7nm，狹縫1.3nm，空氣流量9.5L/min，乙炔流量2.5L/min，燃燒器高度12.5mm。

以標準工作液中鈣的濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。根據(jù)試樣液的吸光度，從標準曲線上查出溶液中對應的鈣濃度值。

（5）平行實驗

按以上步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。

結(jié)果計算按下式計算樣品中鈣的含量

式中：

X：試樣中鈣的含量，g/kg；

c：從標準曲線上查得試樣液中鈣的濃度，ug/mL；

c0：從標準曲線上查的空白液中鈣的濃度，ug/mL；

V：試樣液定容體積，mL；

M：稱取試樣的質(zhì)量，g。

結(jié)果取算術平均值，保留三位有效數(shù)字。

精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不超過算術平均值的10%。

滴定法原理試樣經(jīng)灰化后制成稀酸溶液，在弱酸性溶液中，鈣離子與草酸根離子生成草酸鈣沉淀。過濾后，將沉淀溶于硫酸溶液中，然后用高錳酸鉀標準溶液滴定草酸根離子，求出鈣的含量。

反應式為:

CaCl2+(NH4)2C2O4=CaC2O4↓+2NH4Cl

CaC2O4+H2SO4=CaSO4+H2C2O4

5H2C2O4+2KMnO4+3H2SO4=2MnSO4+K2SO4+10CO2+8H2O

試劑若無特別說明，所用試劑均為分析純,所用水應符合GB/T 6682的要求。

（1）硝酸：優(yōu)級純。

（2）硫酸。

（3）硝酸溶液：硝酸+水=1+1。

（4）硫酸溶液:硫酸=1+24。

（5）乙醇。

（6）乙醇溶液（20%）：量取20mL乙醇、80mL水混勻。

（7）甲基紅（1g/mL）:稱取0.1g甲基紅，用乙醇溶液（20%）溶解并稀釋至100mL。

（8）尿素。

（9）草酸銨溶液(30g/L) :稱取3g草酸銨，用水溶解并稀釋至100mL。

（10）氫氧化銨。

（11）氫氧化銨溶液：氫氧化銨+水=1+49。

（12）高錳酸鉀標準儲備液（0.1mol/L）：按GB/T 601的規(guī)定配制及標定。

（13）高錳酸鉀標準滴定液（0.02mol/L）：吸取50mL高錳酸鉀標準儲備液（0.1mol/L），用水稀釋至250mL。

儀器和設備所有玻璃儀器均以硝酸溶液浸泡2h以上，用去離子水沖洗后晾干或烘干，方可使用。

實驗室常規(guī)設備及下列儀器。

（1）（1）分析天平：可準確稱重至0.001g。

（2）馬弗爐：可控溫于550℃±20℃。

（3）干燥箱。

（4）電熱板。

分析步驟（1）試樣液制備

試樣準備

同原子吸收法

試樣消化

稱取20g試樣（精確至0.1g）放入石英坩堝中，以下操作同原子吸收法。

（2）空白液制備

除不稱取試樣外，均按試樣消化步驟進行操作。

（3）測定

灰化好的試樣用2.5mL硝酸溶液溶解，轉(zhuǎn)移到200mL燒杯中，用少量水沖洗石英坩堝多次，合并洗液，并稀至50mL。在試樣溶液中加甲基紅指示劑3滴、草酸銨溶液10mL，再加尿素4.0g，使之溶解。蓋上表面皿，在電熱板上緩慢加熱，持續(xù)微沸狀態(tài)。當甲基紅的紅色逐漸變?yōu)槌紊珪r，草酸鈣的結(jié)晶即沉淀出來，當溶液變成黃橙色時停止加熱，放冷，室溫下放置4h以上或過夜。用慢速濾紙過濾，將沉淀轉(zhuǎn)移到濾紙上，用氫氧化銨溶液洗表面皿和燒杯4次。而后繼續(xù)用氫氧化銨溶液洗滌沉淀物4～5次。將濾紙連同沉淀置于原燒杯中，用玻璃棒將濾紙攤開并貼附于燒杯壁上，用1:24熱硫酸溶液50mL將沉淀沖下溶解。待沉淀完全溶解后，在水浴中加熱至60～80℃，用高錳酸鉀標準溶液乘熱滴定至溶液呈微紅色，將濾紙全部浸入溶液中，攪拌，繼續(xù)滴定至溶液呈微紅色30s不褪色為終點，滴定至終點時溶液溫度不應低于60℃。記錄所用高錳酸鉀標準滴定液的體積，精確至0.1mL、

（4）平行實驗

按以上步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。

結(jié)果計算按下式計算樣品中鈣的含量

式中：

X：試樣中鈣的含量，g/kg；

c（1/5KMnO4）：高錳酸鉀標準滴定液的實際濃度，mol/L；

V1：滴定試樣液時高錳酸鉀標準滴定液的用量，mL；

V0：滴定空白液時高錳酸鉀標準滴定液的用量，mL；

m：稱取試樣的質(zhì)量，g。

20.04:1.00mL高錳酸鉀標準滴定液c（1/5KMnO4）=1.000mol/L相當?shù)拟}的質(zhì)量，mg。

結(jié)果取算術平均值，保留三位有效數(shù)字。

精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不超過算術平均值的10%。1