鵝細(xì)小病毒感染的流行病學(xué)、臨床特征、診斷技術(shù)與防控措施

1 流行病學(xué)

病原。鵝細(xì)小病毒（GPV）是細(xì)小病毒科、細(xì)小病毒屬的成員，其生物學(xué)特性與番鴨細(xì)小病毒類似，通過電鏡觀察發(fā)現(xiàn)病毒顆粒為圓形或者六角形，呈20面體對稱的晶格排列，直徑大約為20～24nm，沒有囊膜，屬于DNA病毒。由于該病毒不具有囊膜，因此具有較強(qiáng)的抵抗環(huán)境的能力，如在56℃下經(jīng)過3h加熱才會失活，且對胰酶、去污劑以及低pH條件等不敏感。

易感動物。在自然感染條件下，只有雛鵝和雛番鴨可感染發(fā)病，其他禽類和哺乳動物不會感染。3～20日齡的雛鵝易感，且不同日齡、不同免疫情況的鵝群以及不同地區(qū)在發(fā)病率和病死率存在一定差異，但越小日齡發(fā)病有越高的病死率。

傳播途徑。該病主要經(jīng)由糞口途徑進(jìn)行傳播，即該病的主要傳播方式是直接接觸病鵝或者通過污染病毒的飼料、用具、種蛋等進(jìn)行機(jī)械傳播。

2 臨床癥狀及剖檢變化2.1 臨床癥狀小于15日齡的雛鵝無論是自然感染還是人工感染，潛伏期通常都在3～5天；大于15日齡的易感雛鵝無論是自然感染還是人工感染，潛伏期相比于前者要延長1～2天。

該病主要是導(dǎo)致病鵝消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)癥狀。根據(jù)病程持續(xù)時間的長短可分成三種類型，即最急性型、急性型和亞急性型。

最急性型。多是小于7日齡的雛鵝易發(fā)，其往往突然出現(xiàn)發(fā)病和快速死亡，一般在精神沉郁后的數(shù)小時內(nèi)就變得衰弱，或者倒地雙腿胡亂劃動，很快死亡。另外，患病雛鵝的鼻孔存在少量的漿液性分泌物，只需要幾天就會蔓延至全群。

急性型。多是7～14日齡的雛鵝易發(fā)，患病后主要表現(xiàn)出精神沉郁，食欲不振或者廢絕。經(jīng)過大約12h，病鵝往往可見神情呆滯，縮頸閉眼，行動緩慢、無力，無法穩(wěn)定站立，經(jīng)常蹲伏，停止采食，但增加飲水，排出黃綠色或者黃白色的稀糞，且糞便附著在肛門周圍。另外，病鵝張口呼吸，鼻孔四周污穢不潔，喙端發(fā)紺，蹼顏色暗淡，嗉囊變得松軟，里面存在液體和氣泡，機(jī)體脫水，眼結(jié)膜干燥，最終由于休克而死，臨死前會有抽搐或者雙腿麻痹的現(xiàn)象，病程通?？沙掷m(xù)大約2天。

亞急性型。通常在流行后期出現(xiàn)，多是大于14日齡的雛鵝易發(fā)，患病后表現(xiàn)出精神不振，采食減少或者停止，鼻孔存在分泌物，動作緩慢，無法穩(wěn)定站立，往往蹲臥，伴有腹瀉，且糞便污染肛門周圍。病程持續(xù)時間略長，通常為3～7天或者更久，均能夠自愈。

2.2 剖檢變化主要是腸道發(fā)生病變，即小腸各段都發(fā)生充血、嚴(yán)重腫脹，存在大量黏液，黏膜上存在少許蛋花樣的黃白色纖維素滲出物，且中下腸段覆蓋一層淡黃色的假膜，有時可見細(xì)條狀的凝固物，導(dǎo)致小腸呈現(xiàn)"香腸狀"病變。

最急性型。剖檢可見十二指腸黏膜由于充血而呈現(xiàn)彌漫紅色，且表面存在大量的黏液。

急性型。剖檢可見腸道發(fā)生特征性病變，多是小腸的中段和下段出現(xiàn)，尤其是接近回盲部和卵黃囊柄的腸段，外觀明顯膨大，其體積往往可達(dá)到正常腸段的3～4倍，如同香腸狀，觸感緊實。剪開膨大處的腸壁，發(fā)現(xiàn)腸壁變薄、緊張，腸腔中存在凝固的淡黃色或者淡灰白色的栓子狀物，其是由凝固的纖維素性滲出物和壞死腸黏膜組織構(gòu)成，導(dǎo)致腸腔被徹底堵塞。

亞急性型。剖檢主要是發(fā)生急性卡他性腸炎，同時肝臟呈黃紅色或者深紫紅色，并發(fā)生腫大，膽囊明顯膨大，含有大量暗綠色的膽汁；脾臟和胰腺都發(fā)生充血，有時會存在灰白色的壞死點。

3 實驗室診斷技術(shù)3.1 血清學(xué)診斷技術(shù)病毒中和試驗。其基本原理是抗原抗體反應(yīng)，即在病毒的關(guān)鍵性位點結(jié)合對應(yīng)的抗體后就不能夠正常吸附和感染，從而無法導(dǎo)致細(xì)胞病變（CPE），這是一種最常用旳血清學(xué)診斷方法。

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。該法是目前生物學(xué)領(lǐng)域中一種最常用的檢測技術(shù)，且已經(jīng)逐漸作為常規(guī)手段用于檢測動物流行的病原體。該技術(shù)具有安全性好、操作簡單、敏感性高、結(jié)果快速的優(yōu)點，常用的有雙夾心ELISA法、斑點ELISA法，通常只需要3～4h即可做出診斷，適合在鵝群發(fā)病早期進(jìn)行診斷。但由于該技術(shù)需要制備單克隆抗體，使其在在基層獸醫(yī)的臨床上推廣受到一定限制。

免疫熒光診斷法。該方法包括直接熒光法和間接熒光法。其中直接熒光法是實驗室中比較多用的檢查方法，是指在抗體或者抗原上標(biāo)記熒光素，接種用其進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，其特點是敏感性高、特異性好、耗時短等，但由于依舊存在非特異性染色的問題，導(dǎo)致判斷結(jié)果存在較大的主觀性；間接免疫熒光法是指將待檢病料制成觸片或者切片，接著分別滴加標(biāo)準(zhǔn)抗GPV的陰性、陽性血清，最后加入用熒光標(biāo)記的二抗進(jìn)行顯色，但要求必須配置使用熒光顯微鏡。

膠體金免疫層析技術(shù)。該技術(shù)已經(jīng)在多方面的檢測中被應(yīng)用，其提點是操作簡便、不需復(fù)雜儀器、特異性強(qiáng)、敏感性高，且檢測結(jié)果直觀等。

3.2 分子生物學(xué)檢測技術(shù)PCR技術(shù)。該技術(shù)是目前各種病毒學(xué)診斷技術(shù)中敏感性最高的一種檢測方法，其優(yōu)點是特異性好，能夠一次性對較大量的標(biāo)本進(jìn)行檢測，無需要進(jìn)行病毒分離和提純。

原位雜交技術(shù)。該技術(shù)是通過地高辛標(biāo)記的GPVSS DNA探針來檢測鵝細(xì)小病毒，這是由于該探針只可與病毒的核酸發(fā)生陽性反應(yīng)，而不會與鵝胚尿囊液、正常鵝胚組織以及鵝肝等組織發(fā)生反應(yīng)，因而其靈敏度非常高、特異性非常強(qiáng)。另外，該技術(shù)能夠準(zhǔn)確且快速地、檢測出是否存在鵝細(xì)小病毒核酸，且有較高的重復(fù)性。

環(huán)形等溫擴(kuò)增技術(shù)。該技術(shù)的要點是針對目的片段的6個區(qū)域設(shè)計4條特異性引物，在大約65℃恒溫條件下，借助鏈置換DNA聚合酶對目的片段進(jìn)行高效擴(kuò)增，其優(yōu)點是操作簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、耗時短等，且無需任何貴重的儀器，只需要一個水浴鍋即可完成操作，通常在獸醫(yī)基層部門的實驗室診斷和野外的臨床診斷中適用。

4 防控措施4.1 疫情處理發(fā)現(xiàn)病鵝后立即隔離，對病死鵝必須采取深埋處理，并先清掃干凈鵝舍，接著使用高壓水沖洗，然后潑灑2%氫氧化鈉溶液進(jìn)行消毒，同時將食槽、飲水器浸泡在1%高錳酸鉀溶液進(jìn)行消毒，還要配合進(jìn)行帶鵝消毒，每周至少3次，連續(xù)進(jìn)行2周。

對于沒有發(fā)病的雛鵝，可每只皮下注射0.5～0.8mL高效價抗血清或者1.0mL精制蛋黃抗體，注意在血清或蛋黃抗體中可添加適量的廣譜抗菌藥；對患病雛鵝，可每只皮下注射1.0mL高效價抗血清或者1.5mL精制蛋黃抗體，同時按每千克飲水添加4g電解多維混飲，可使治愈率提高，并減少發(fā)生應(yīng)激。

4.2 免疫接種目前，預(yù)防該病的發(fā)生主要是給鵝群免疫接種鵝細(xì)小病毒疫苗，可選用活疫苗和滅活疫苗兩種，其中滅活疫苗具有安全、便于貯存以及免疫期長的優(yōu)點，適合在臨床上應(yīng)用。

推薦免疫程序：種鵝在開產(chǎn)前20天進(jìn)行首免，在120日齡進(jìn)行二免，每次每只接種1mL疫苗；雛鵝在3日齡進(jìn)行首免，每只接種0.5mL疫苗，之后在90日齡進(jìn)行二免，每只接種1.0mL疫苗。對于沒有母源抗體的雛鵝，由于會存在抗體空白期，最好在出殼后配合使用高免疫血清或者卵黃抗體來預(yù)防發(fā)病。